- P-ISSN 1225-0163
- E-ISSN 2288-8985
방사흐름 전지를 연결한 고성능 액체 크로마토그래프를 사용하여 독소루비신, 에피루비신, 노갈라마이신, 다우노루비신 및 아이다루비신을 동시에 정량 할 수 있는 역상 크로마토그래피법을 개발하였다. 안트라사이클린계 항생제들은 이동상 용매 중에서 은/염화은 (0.01 M NaCl) 기준전극에 대하여 확산 전류를 나타내는 -0.74 V에서 검출되었다. 부피 흐름속도 (<TEX>$V_f$</TEX>)를 1.0 mL/min로 고정하였을 때 독소루비신, 에피루비신, 다우노루비신 및 아이다루비신은 각각 6.4 분, 7.4분, 12.7분 및 18.4분의 머무름 시간 (<TEX>$t_r$</TEX>)에서 나타났으며, <TEX>$V_f$</TEX> 0.6 mL/min 에서는 독소루비신, 에피루비신, 노갈라마이신, 다우노루비신 및 아이다루비신의 <TEX>$t_r$</TEX>은 각각 9.9분, 11.5분, 13.5분, 19.6분 및 28.7분에서 나타났다. 주입된 각각의 안트라사이클린계 항생제의 농도 (<TEX>$2.40{\times}10^{-7}M{\sim}1.42{\times}10^{-5}M$</TEX>)에 대하여 봉우리 면적 (전하)를 도시하였을 때 상관계수의 제곱 (<TEX>$R^2$</TEX>)은 0.999 이상으로 직선 성이 우수하였다. 다섯 가지 안트라사이클린계 항생제의 검출한계는 <TEX>$1.0{\times}10^{-8}M{\sim}1.5{\times}10^{-7}M$</TEX>이었으며 정밀도는 <TEX>$0.7{\mu}M$</TEX> 이하의 농도를 제외하고는 상대 표준편차3%(<TEX>$1.00{\times}10^{-6}M{\sim}1.42{\times}10^{-5}M$</TEX>) 미만이었다. 사람의 혈청 중에 포함된 <TEX>$1.00{\times}10^{-5}M$</TEX> 에피루비신, <TEX>$0.48{\times}10^{-5}M$</TEX> 노갈라마이신 및 <TEX>$1.52{\times}10^{-5}M$</TEX> 다우노루비신을 <TEX>$C_{18}$</TEX> 카트리지로 고상 추출하였을 때 회수율은 각각 97%, 100% 및 90% 이었다.
The analytical method of HPLC with the radial-flow electrochemical cell (RFEC) has been developed to determine doxorubicin, epirubicin, nogalamycin, daunorubicin and idarubicin simultaneously by employing a reversed-phase chromatography. Anthracyclines were detected at -0.74 V vs. a Ag/AgCl (0.01 M NaCl) reference electrode, a potential of diffusion current plateau in the mobile phase. At a <TEX>$V_f$</TEX> of 1.0 mL/min doxorubicin, epirubicin, daunorubicin and idarubicin appeared at a retention time (<TEX>$t_r$</TEX>) of 6.4 min, 7.4 min, 12.7 min and 18.4 min, respectively, while at a <TEX>$V_f$</TEX> of 0.6 mL/min, doxorubicin, epirubicin, nogalamycin, daunorubicin and idarubicin appeared at a <TEX>$t_r$</TEX> of 9.9 min, 11.5 min, 13.5 min, 19.6 min and 28.7 min, respectively. The linearity between each anthracycline injected (<TEX>$2.40{\times}10^{-7}M{\sim}1.42{\times}10^{-5}M$</TEX>) and peak area (charge) was excellent with the square of the correlation coefficient (<TEX>$R^2$</TEX>) higher than 0.999. The detection limits were <TEX>$1.0{\times}10^{-8}M{\sim}1.5{\times}10^{-7}M$</TEX> for the five anthracyclines. Within-day precision for the five anthracyclines were in reasonable relative standard deviations less than 3 % (<TEX>$1.00{\times}10^{-6}M{\sim}1.42{\times}10^{-5}M$</TEX>) except the lower concentrations less than <TEX>$0.7{\mu}M$</TEX>. Solid phase extractions of <TEX>$1.00{\times}10^{-5}M$</TEX> epirubicin, <TEX>$0.48{\times}10^{-5}M$</TEX> nogalamycin and <TEX>$1.52{\times}10^{-5}M$</TEX> daunorubicin from human serum with a <TEX>$C_{18}$</TEX> cartridge resulted in 97 %, 100 % and 90 % of recoveries, respectively.
Korea Food and Drug Administration, (2000) ?The MinimumRequirements for Antibiotic Products of Korea?, Yakup Shinmoon Co., Korea
D. C. Harris, (2005) ?Exploring Chemical Analysis?, Freeman and Company, New York, U.S.A.