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모노리틱 칼럼을 이용한 혈장 중 펜시클로버의 HPLC 신속분석법 개발 및 이를 이용한 생물학적동등성시험
Development of a rapid HPLC method for the determination of penciclovir in human plasma using a monolithic column and its application to a bioequivalence study
분석과학 / Analytical Science and Technology, (P)1225-0163; (E)2288-8985
2007, v.20 no.4, pp.323-330
(중앙대학교)
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염정록,
김진희,
박아연,
정은하,
이철우,
&
이태호.
(2007). 모노리틱 칼럼을 이용한 혈장 중 펜시클로버의 HPLC 신속분석법 개발 및 이를 이용한 생물학적동등성시험. 분석과학, 20(4), 323-330.
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초록
본 연구에서는 건강한 성인 혈장 중의 펜시클로버를 모노리틱(monolithic) 칼럼을 이용한 고성능 액체크로마토그래피(HPLC)-형광검출법으로 신속하게 분석하는 방법을 개발하였다. 충전형 ODS 칼럼보다 빠른 유속에서 고분리능을 구현할 수 있는 모노리틱 칼럼을 사용하였고, 이동상에 이온쌍 시약(ionpairing reagent)인 sodium dodecyl sulfate와 잔존 실라놀기(residual silanol group)를 차폐하는 triethylamine을 첨가하여, 용매 조성과 유량에 대한 기울기 용리(gradient elution)를 실시하였다. 그 결과, 펜시클로버와 내부표준물질로 사용한 간시클로버의 머무름시간을 4분 이내로 단축시킬 수 있었다. 확립된 방법으로 분석법 검증을 실시한 결과, <TEX>$0.1{\sim}5{\mu}g/mL$</TEX>의 농도 범위 내에서 검량선의 상관계수가 0.9994로 양호한 직선성을 나타내었다. 또한 하루에 5번 반복 실험하여 구한 일내 정밀성과 정확성은 1.36~8.55%, 92.8~100.0%이었고, 5일간 반복 실험하여 구한 일간 정밀성은 0.93~5.62%이었으며, 정량한계는 <TEX>$0.1{\mu}g/mL$</TEX>이었다. 건강한 성인 24명을 대상으로한 팜시클로버 제제의 생물학적동등성시험에 본 분석법을 적용하였으며, 생물학적동등성시험 판단기준에 따라 시험약이 대조약에 대하여 동등한 것으로 판명되었다.
- keywords
- Penciclovir, HPLC-Fluorescence Detection, Monolithic column, Bioequivalence study, Plasma.... ...... (penciclovir, 2-amino-9-[4-hydroxy-3-(hy-droxymethyl)butyl]-3H-purin-6-one). prodrug. ..... (famciclovir). .... nucleoside ...... .... (Fig. 1). ..., Penciclovir, HPLC-Fluorescence Detection, Monolithic column, Bioequivalence study, Plasma.... ...... (penciclovir, 2-amino-9-[4-hydroxy-3-(hy-droxymethyl)butyl]-3H-purin-6-one). prodrug. ..... (famciclovir). .... nucleoside ...... .... (Fig. 1). ...
Abstract
A simple and rapid HPLC method with fluorescence detection(FLD) for quantitation of penciclovir in human plasma using a monolithic column was developed and validated. Penciclovir and ganciclovir(internal standard, I.S.) were separated on a Chromolith column RP-18e (<TEX>$4.6{\times}100mm$</TEX>) with a mobile phase consisting of a mixture of (A) methanol/50 mM sodium phosphate buffer containing 200 mg/L sodium dodecyl sulfate (3/97, pH 2.5) and (B) methanol/50 mM sodium phosphate buffer containing 200 mg/L sodium dodecyl sulfate (50/50, pH 2.5) at a flow gradient of <TEX>$1.6{\sim}4.0mL/min$</TEX>. The retention times of penciclovir and internal standard were less than 4.0 min. Calibration curve was linear (<TEX>$R^2
- keywords
- Penciclovir, HPLC-Fluorescence Detection, Monolithic column, Bioequivalence study, Plasma
참고문헌
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