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  • P-ISSN1225-0163
  • E-ISSN2288-8985
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13권 5호
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Mistletoe lectin I/D-galactose의 인식결합에 기초한 Mistletoe lecti I에 대한 용액상 효소결합분석법에 관한 연구

Homogeneous Enzyme-linked Binding Assay for Mistletoe Lectin I Based on the Mistletoe Lectin I/D-galactose Interaction

분석과학 / Analytical Science and Technology, (P)1225-0163; (E)2288-8985
2000, v.13 no.5, pp.624-629
이인숙
이은아
전종순
이인숙, 이은아, & 전종순. (2000). Mistletoe lectin I/D-galactose의 인식결합에 기초한 Mistletoe lecti I에 대한 용액상 효소결합분석법에 관한 연구. 분석과학, 13(5), 624-629.
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초록

Mistletoe lectin I(ML I)에 대한 간단하고 빠른 용액상 효소결합 분석법을 렉틴의 당 특이성을 이용하여 개발하였다. ML I에 특이성을 가지고 있는 D-galactose를 사용하였으며, 용액상 분석법의 효소로는 malate dehydrogenase(MDH)를 사용하였다. 분석신호물질로 사용되는 MDH-galactose 접합체는 isothiocyanate 방법을 통해 합성하였으며, 이 접합제는 thiourea 결합을 하고 있다. ML I의 존재하에, ML I은 D-galactole와의 특이 인식결합을 통해 MDH-galartose 접합체의 활동도를 억제한다. 그러므로, 존재하는 ML I의 농도는 MDH-galactose 접합제의 촉매활동도의 억제도에 비례하게 된다. 따라서, 본 용액상 효소결합 분석법을 통하여 <TEX>${\mu}g/mL$</TEX> 수준의 ML I의 측정이 분석 시간 10분 이내에 가능하였다.

keywords
mistletoe lectin I, D-galactose, homogeneous assay, enzyme-linked binding assay

Abstract

A simple and rapid homogeneous enzyme-linked binding assay for mistletoe lectin I(ML I) was developed using a coupled enzyme system of malate dehydrogenase (MDH) and D-galactose. A highly substituted MDH-galactose conjugate was prepared by employing an isothiocyanate method for formation of thiourea bond. In the presence of ML I, ML I inhibits the activity of the conjugate based on the ML I/D-galactose specific interaction. Thus, the concentration of ML I can be related to the homogeneous inhibition of the MDH-galactose conjugate. Using this method. ML I can be measured at the level of microgram per milliliter within 10 minutes.

keywords
mistletoe lectin I, D-galactose, homogeneous assay, enzyme-linked binding assay


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