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사철느타리버섯 중 <TEX>$G_{418}$</TEX>-sensitive 미토콘드리아성 ATPase/ATP synthase의 특성
Characteristics of <TEX>$G_{418}$</TEX>-sensitive mitochondrial ATPase/ATP synthase from pleurotus florida
분석과학 / Analytical Science and Technology, (P)1225-0163; (E)2288-8985
1992, v.5 no.4, pp.477-484
김재웅,
김동희,
이정복,
이서구,
&
민태진.
(1992). 사철느타리버섯 중 <TEX>$G_{418}$</TEX>-sensitive 미토콘드리아성 ATPase/ATP synthase의 특성. 분석과학, 5(4), 477-484.
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초록
형질 전환된 사철느타리버섯으로부터 초원심분리 및 설탕밀도 기울기법으로 44% 층에서 미토콘드리아를 분리정제하였다. ATPase와 ATP synthase의 최적 활성조건은 각각 pH 7.4, <TEX>$60^{\circ}C$</TEX> 및 pH 7.5, <TEX>$57^{\circ}C$</TEX>였고, km값은 11.6mM과 8.4mM였다. ATPase는 기질농도 5~6mM의 ATP에서, ATP synthase는 5~10mM ADP 농도에서 활성이 높으며, 그 이상의 농도에서는 기질 저해를 받았다. ATPase/ATP synthase 모두 <TEX>$Mg^{2+}$</TEX> 의존성 효소로 <TEX>$G_{418}$</TEX>으로 비경쟁적인 저해를 받았다. 효소의 아미노산 분석결과 hydrophobic 아미노산 잔기는 50.5%, small 아미노산 잔기는 56.1%, hydrogen bonding 아미노산 잔기는 43.7%, helix breaking 아미노산 잔기는 55.2%였다. 인지질을 분석한 결과 phosphatidyl glycerol, phosphatidyl choline 및 phosphatidyl ethanolamine으로 구성되었고 phosphatidyl serine과 phosphatidyl inositol은 전혀 없었다. 포화 지방산은 palmitate(51.31%)와 stearate(18.32%)의 함량이 많았고, 불포화 지방산(<TEX>$C_{18:1}$</TEX>, <TEX>$C_{18:2}$</TEX> 및 <TEX>$C_{16:1}$</TEX>)의 함량도 많았다.
- keywords
- ATPase, ATP synthase, pleurotus florida
Abstract
The mitochondrion was purified at 44% sucrose layer from pleurotus florida by using ultracentrifuge and sucrose density gradient method. Optimum pH and temperature of ATPase and ATP synthase were pH 7.4, <TEX>$60^{\circ}C$</TEX> and pH 7.5, <TEX>$57^{\circ}C$</TEX> respectively, also their Km values were determined as 11.6mM and 8.4mM. ATPase was activated at 5~6mM ATP substrate concentration, then ATP synthase was 5~10mM range ADP. ATPase/ATP synthase were <TEX>$Mg^{2+}$</TEX>-dependent enzyme, partially inhibited by their substrate, and then showed an none competitive inhibition pattern by <TEX>$G_{418}$</TEX>. Amino acid composition of ATPase/ATP synthase was as follows, hydrophobic amino acid residue was 50.5%, small residue, 56.1%, hydrogen bonding residue, 43.7% and helix breaking residue, 55.2%. Phosphatidyl choline, phosphatidyl ethanolamine and phosphatidyl glycerol were contained but not phosphatidyl inositol and phosphatidyl serine. Palmitate(51.31%), stearate(18.32%) and unsaturated fatty acids(<TEX>$C_{18:1}$</TEX>, <TEX>$C_{18:2}$</TEX> and <TEX>$C_{16:1}$</TEX>) were predominated.
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