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커플드칼럼크로마토그래피에 의한 사람 혈장 중테르부탈린의 정량
Determination of terbutaline in human plasma by coupled column chromatography
분석과학 / Analytical Science and Technology, (P)1225-0163; (E)2288-8985
2015, v.28 no.2, pp.125-131
https://doi.org/10.5806/AST.2015.28.2.125
(강원대학교 약학대학)
(강원대학교 약학대학)
(강원대학교)
(강원대학교 약학대학)
(강원대학교)
고미영,
전상설,
&
김경호.
(2015). 커플드칼럼크로마토그래피에 의한 사람 혈장 중테르부탈린의 정량. 분석과학, 28(2), 125-131, https://doi.org/10.5806/AST.2015.28.2.125
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초록
사람혈장 중 베타투 수용체 작용약 테르부탈린의 정량법을 개발하고 밸리데이션을 실시하였다. 혈장시료를 Sep-pak 실리카를 이용하여 고상추출한 후 HPLC로 측정하였다. C18 칼럼을 사용하여 혈장 중의 방해물질로부터 테르부탈린 분획을 분리하여 실리카칼럼으로 보내어 테르부탈린과 내부표준물질을 분리 정량하였다. 두 칼럼은 짧은 실리카 전칼럼이 달린 절환밸부로 연결하여 사용하였다. C18 칼럼의 이동상에 녹아있는 테르부탈린의 분획은 전칼럼에서 농축되어 실리카칼럼으로 보내지고 형광 여기파장 276 nm와 들뜸파장 306 nm로 측정하였다. 이 분석법은 여섯 명의 혈장에서 특이성이 있음을 확인하였다. 혈장 중 테르부탈린 0.4-20.0 ng/mL 농도범위에서 상관계수 0.9999로 양호한 직선성을 나타내었다. 정량한계농도는 0.4 ng/mL 농도로 정밀도가 10.1% 를 나타내었다.
- keywords
- terbutaline, coupled column chromatography, HPLC, solid phase extraction, plasma
Abstract
A method was developed and fully validated for the determination of terbutaline, a β2-receptor agonist, in human plasma. Plasma samples were prepared by solid-phase extraction with Sep-Pak silica, followed by high-performance liquid chromatography (HPLC). The terbutaline was pre-separated from the interfering components in plasma on a Luna C18 (2) column, and terbutaline and salbutamol as an internal standard were resolved and determined on a Luna Silica column. The two columns were connected by a switching valve equipped with silica pre-column. The pre-column was used to concentrate the terbutaline in the eluent from the C18 column before back-flushing onto the silica column with fluorescence detection at an excitation/emission wavelength of 276/306 nm. The method was shown to be specific by testing six different human plasma sources. Linearity was established for a concentration range of 0.4-20.0 ng/mL with a correlation coefficient of 0.9999. The lower limit of quantitation was 0.4 ng/mL with a precision of 10.1% as C.V.%.
- keywords
- terbutaline, coupled column chromatography, HPLC, solid phase extraction, plasma
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